Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的步骤中逐渐扩展

从第一次消失人体内自身病原体到消失1M-冠心病医学疼痛的成效数万人在幼儿时期就有很好的描述，多个人体内自身病原体之中性的幼儿之中有70%在血清转换后10年中患上冠心病，而随访15年的幼儿这一比例增大到84%。相对来说之下，占去医学1M-冠心病一半以上的M-1M-冠心病的患病机制还无法受益应有的数据分析。

越来越多的人开始用作已确定管理系统来定义1M-冠心病的成效：生殖在消失多种人体内自身病原体时进入第1阶段，消失血糖异常时进入第2阶段，消失疼痛时进入第3阶段。一些多发人体内自身病原体之中性的生殖，在1期和2期，成效较迟，并发展为患病的1M-冠心病。我们之后描述了三组成员在首次样品到多种人体内自身病原体抽样后据估计10年无冠心病的极迟成效者，这组成员病变人数更少，但特征非常明确。随后，我们挖掘出人体内自身上皮本站粒体特异性CD8+T本站粒体化学反应在成效缓迟的病变之中基本不依然存在，但在近期患病和值得注意的冠心病病变之中很非常容易样品到。这也许确实，与成效病变相对来说，这些病变自身免疫化学反应的平衡增强。

早期数据分析确实，尽管平衡性T本站粒体(Treg)为数正常，但冠心病病变依然存在一些系统缺陷，其之中还包括对IL-2的化学反应能力提高。此外，冠心病病变之中的波动CD4+T本站粒体也许对平衡来得具抵抗性，平庸为波动T本站粒体的可抑制西移动，自然产生的Treg和胃产生的可借Treg，以及上皮本站粒体经历的CD4+T本站粒体之中IL-2化学反应西移动。本数据分析的目的是描述了CD4+平衡性T本站粒体(Treg)在一小群极缓迟成效者之中的特征，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访间隔时间为18-32年。

方法：BOX数据分析是一项以人群辅以的纵向数据分析，在21岁以下确诊的病变亲属之中化验1M-冠心病的有也许因素。我们之后描述了依然缓迟成效者的特征，他们保持多重人体内自身病原体之中性超过10年，但无法消失冠心病的医学疼痛，迟性或非来进行性自身免疫。随后，10名继续保持无冠心病并情愿共享大量血液抽样的缓迟成效者不属于T和B本站粒体系统分析。在现今的数据分析之中，8名迟成效者(SP组成员)，之中位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁错综复杂的人体内自身病原体之中性。所有的旁观者都处于1M-冠心病成效的1期，尽管一些人随后保住了人体内自身病原体对某些上皮本站粒体的之中性化学反应，然而，一名病变已经处于2期据估计6年，但无法消失医学疼痛，一名病变被病因为冠心病，该病人72岁，在采集实验抽样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在生物信息学之中对该可借来进行了单独评估。转化外周血单个核能本站粒体(PBMCs)，采用多实例流式本站粒体练成和T本站粒体可抑制测试评估可借之中Treg的频数万人、表M-和系统。用作FlowSOM和CITRUS(聚类解剖、表征和回归)来进行无监督聚类分析，评估Treg表M-。

结果：与卫生可借相对来说，来自迟成效体的梦境CD4+T本站粒体的监督聚类辨识，激活的梦境CD4+ Treg频数万人增大，与免疫抑制可借的TNFR特别亚基(GITR)理解增大有关。一名HbA1c升高的病变与成效缓迟者和也就是说的压制组成员相对来说，Treg小曲有所相同。系统新挖掘出，与卫生可借相对来说，来自缓迟成效体的Treg介导的CD4+波动T本站粒体可抑制明显受损。平庸为对波动CD4+T本站粒体CD25和CD134理解的可抑制增大。

绘出1 集中的表M-分析辨识，CD4+Treg亚M-在迟成效队列之中增大。由FlowSOM降解的Treg过道，涌进在来自所有可借的活CD4+CD45RA -本站粒体上。根据标识物理解解剖显露10个元簇:梦境T本站粒体_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T本站粒体;HLA-DR + GITR +梦境T本站粒体;本站程Treg_1;本站程Treg_2;本站程Treg_3;和本站程Treg_4。(a)用作9个相同Treg标识降解的10个元簇的MST。每个键值代表一个坦克部队(100个坦克部队)，来得大的元坦克部队(10个元坦克部队)在键值组成员一处上色。每个键值之中的甜品绘出坚称单个标识的理解层级。(b)每个元聚类的热绘出，以辨识整体标识理解。(c, d)为HD组成员(c)和SP组成员(d)降解绘出，以及FlowSOM识别的每个元簇的沙质。(e-l)相较丰度为每个metacluster盒本站绘出(丰度> 0.05%)相符为HD和SP组成员:本站程Treg_2 (e),本站程Treg_3 (f),本站程Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T本站粒体(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T本站粒体(l)。橘色圆圈代表捐助者SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon筛选符号秩化验。此键适用于绘出形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

绘出2 用作CITRUS的预测模M-确实，Treg频数万人的增大是成效缓迟的标志。分级奈斯(a - f)和葡萄分析(g-k)比起SP旁观者和也就是说的HD旁观者在CD4+CD45RA−T本站粒体上的差异。(a)杂交CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会阶层的代表性绘出。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR理解来进行转化，模拟FlowSOM社会阶层。(b) HD(网纹)和SP(蓝点)组成员以及可借SP 606(橘色)之中CD25+ cd127的频数万人汇总绘出。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+奈斯长子集的盒本站绘出;(c) HLA-DRloGITR−(本站程Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(本站程Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(本站程Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+本站程T cell)。(g - i)玉米簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3理解高强度着色，上标突显露的簇被识别为SP和HD队列错综复杂的相同。(j)盒本站绘出辨识了在SP(蓝点)和HD(灰点)组成员之中，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的相较丰度(比例)。(k)压制点辨识每个簇的表M-(粉红色)和Treg标识相较理解与剧中理解(粉红色);上列，本站程Treg_3;比如说一行，本站程Treg_4。剧中与所有其他簇之中标识的理解有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon筛选符号秩化验

绘出3 与卫生献血者相对来说，成效缓迟者梦境treg的GITR增大。每个梦境CD4+T本站粒体元簇(梦境T本站粒体_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T本站粒体;HLA-DR + GITR +梦境T本站粒体;本站程Treg_2;本站程Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)样品每个理解标识的变异。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的理解热绘出(sp606不还包括在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇之中所有HD(灰色)、所有SP(粉红色)和SP 606(橘色)的FlowSOM GITR理解接在，辨识压制点(c)和汇总绘出(d)。Wilcoxon筛选符号秩和化验，p< 0.07(橘色)所有可借还包括，p< 0.05(粉红色)可借SP 606和也就是说的HD不还包括在测试之中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之中GITR理解，从分级奈斯，从所有HD(灰色)、所有SP(粉红色)和SP 606(橘色)接在，辨识压制点(e)和汇总绘出(f) *p< 0.05, Wilcoxon筛选符号秩化验

绘出4 来自缓迟成效的CD4+ treg本站粒体压制波动CD4+T本站粒体的能力提高。SP组成员用粉红色的本站和圆圈坚称，HD组成员用灰色的本站和圆圈坚称，橘色的本站/圆圈坚称可借sp606。用作CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T本站粒体来进行分选。CD4+CD25−(；也者)被标识为CFSE, Treg按检视的比例滴定。用抗CD3 /28微珠激活本站粒体，培植3几天后来进行流式本站粒体练成样品。(a-d)与CD4+；也者相较应的treg培植(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD；也者培植。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE可抑制总和(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制总和。用作之中性对照(激活的拥护本站粒体不含treg)计算可抑制总和。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比起测试

绘出5 波动CD4+T本站粒体对缓迟成效的T本站粒体激活的可抑制来得敏感。SP组成员用粉红色的本站和圆圈坚称，HD组成员用灰色的本站和圆圈坚称，橘色的本站/圆圈坚称可借sp606。用作CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T本站粒体来进行分选。CD4+CD25−(；也者)被cfsel标识，treg按检视的比例滴定。用抗CD3 /28微珠激活本站粒体，培植3几天后来进行流式本站粒体练成(CD25反染)和趋化因长子分析。HD Treg与HD、SP或sp606；也者共同培植。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE可抑制百分数万人(b)。(c,d) CD25可抑制百分数万人(c)和CD134可抑制百分数万人(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培植之中的理解。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比起测试

得显露结论：我们得显露的得显露结论是，来自缓迟成效长子的激活梦境CD4+Treg在GITR理解之中受益了扩充和丰富，强调了促使数据分析Treg在1M-冠心病风险生殖之中的异质性的必要性。

原文典故：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28